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分享一些我们安装色谱柱的方法,希望有您有所帮助

  色谱柱是亲水相互作用色谱柱,其保留模式类似于正相,同时又突破了正相模式的溶剂局限。
 
  分离原理:
  采用反相流动相体系,而按照正相顺序出峰。通过亲水性相互作用,可有效的分离反相色谱柱中因保留能力弱而难分离的强极性化合物。是一种分离机理,而具备这种分离机理的键合相种类非常多。在HILIC中,固定相是极性的,流动相中的水相部分表现为强洗脱溶剂,这与传统的反相色谱法完全相反。

  色谱柱的作用机理:
  可以被认为是反相液相色谱通过采用极性固定相来运行的。采用的流动相是含有少量水/缓冲盐或其他极性溶剂的高比例有机相。流动相中的水形成一个富水层被吸附在固定相表面,极性物质首先进入富水层得到保留。极性化合物是通过一个复杂的混合模式被保留的,包括:富水层和流动相之间的亲水分配、极性官能团和固定相间的氢键作用以及离子官能团的静电作用。当然,亲水分配是主要的保留模式。从保留机理来看,HILIC和反相色谱柱是有着非常大的差别的。
 
  色谱柱的特点:
  1、提供氢键、分子以及静电引力的多重作用;
  2、能为强极性的目标物提供合适的保留;
  3、分离极性、亲水性的小分子目标物以及碱性药物分子;
  4、同时与阴、阳离子产生弱静电作用,对目标物具有不同选择性;
  5、采用水溶性有机相作为流动相,能够显著改善样品在流动相中的溶解度。
 
  色谱柱的安装:
  1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。
  2、为了使色谱柱与仪器系统达较佳的连接效果,应尽量使用与色谱柱接口相匹配的螺帽和锥形接头,如原来的接头长期匹配其他类型的色谱柱,建议在连接新色谱柱前应检查匹配情况,避免造成色谱柱的损坏或因色谱柱不匹配造成的漏液。
  3、使用PEEK 材料的通用接头,只需用手拧紧不需要特定扳手,使用压力为5000psi;使用温度不得超过100℃。

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