如何才能正确使用色谱柱？

　　色谱柱是一种基于大孔径Fused-Core技术的快速、高效型液相色谱柱。它紧密键合了二甲基丁基，封端，是一种非常稳定的反相柱，可用于分离蛋白等大分子物质。

 

　　应用范围： 

　　1、pH值范围宽：

　　①pH＞8时，许多C18硅胶基质由于填料颗粒溶解，色谱柱内产生空隙，会过早地失去柱效。随着键合相覆盖率的增加，色谱柱寿命会延长。

　　②pH＜2时，许多C18硅胶基质由于键合相的水解作用，会过早地失去柱效。使用三官能团键合相可获得较佳稳定性。

　　2、高温稳定性。

 

　　它的优势：

　　1、更低的疏水性，适于快速分离：

　　色谱柱提供与C18和C8相似的选择性，但保留更低。更短的链长和更低的疏水特性使C4成为保留和分离疏水性多肽和蛋白质的理想固定相。

　　2、具有出众的峰形，高柱效和较高的灵敏度：

　　以同样的高纯硅胶作为基质，色谱柱能提供良好的峰形。色谱柱提供1.9μm的粒径，以实现更快、更高效的分离。

 

　　色谱柱的使用方法：

　　1、新柱活化：新的色谱柱活化：采用100%甲醇1ml/min冲洗60min，再换成流动相进行平衡；如果流动相中含有缓冲盐，在换成流动相前，请使用过渡流动相过渡后再换流动相平衡；

　　2、色谱柱保存溶液与评价报告一致。

　　3、在使用过程中如果流动相没有磷酸缓冲盐的存在，新柱子在使用之前需用100%的甲醇以0.5~1.0的流速平衡30min左右，进流动相，待系统基线平稳直接进样即可。做完实验再用100%的纯甲醇以0.5~1.0的流速冲洗30min左右，最后用100%的纯甲醇保存。

　　4、在使用过程中如果流动相有磷酸缓冲盐的存在，新柱在使用之前需用10%的甲醇水溶液以0.5~1.0的流速冲洗60min左右，将新柱高浓度甲醇溶液置换掉，进流动相，待系统基线平稳直接进样即可。做完实验再用10%的甲醇（色谱纯）水溶液以0.5~1.0的流速冲洗60min左右，将色谱柱中缓冲盐溶液置换掉，最后用100%的纯甲醇清洗30min，最后用纯甲醇保存色谱柱。