色谱柱在使用前，先进行柱的性能测试

　　色谱柱主要由柱管、压帽、卡套、筛板、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。

 

　　色谱柱两端的柱接头内装有筛板，是烧结不锈钢或钛合金，取决于填料粒度，目的是防止填料漏出，柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定，目的是为了避免管壁效应。

 

　　色谱柱在使用前，先进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。

　　在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行，只有这样，测得的结果才有可比性。但要注意柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。

　　1、样品的前处理：

　　①先使用流动相溶解样品；

　　②使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质；

　　③使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。

 

　　2、流动相的配制：

　　液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：

　　①流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中；

　　②流动相与样品不产生化学反应；

　　③流动相的黏度要尽量小，以便得到好的分离效果；降低柱压降，延长泵的使用寿命；

　　④流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制；

　　⑤流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行；

　　⑥在流动相配制好后，一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。

 

　　3、流动相流速的选择：

　　因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱，要追求较佳柱效，使用较佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱，流速一般选择1ml/min，对于内径为4.0mm柱，流速0.8ml/min为佳。

　　当选用较佳流速时，分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间。