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产品名称: 食品中folic acid 叶酸免疫亲和柱 IAC-SEP
产品时间: 2020-07-15
产品型号: 叶酸
产品特点: 食品中folic acid 叶酸免疫亲和柱 IAC-SEP
使用对象

IAC-SEP®叶酸亲和柱能够特异性的纯化样品中的叶酸,它采用了柱状琼脂糖凝胶作为固相载体,琼脂糖凝胶与叶酸抗体偶联形成免疫吸附剂,装柱制成免疫亲和柱。它能够特异性的纯化样品中的叶酸。叶酸亲和柱广泛地应用于饮料、牛奶和谷物等样品的提取,该方法速度快、操作简单、准确性高,对提高食品的质量和安全性起到十分重要的作用。

食品中folic acid 叶酸免疫亲和柱 IAC-SEP 的详细介绍

食品中folic acid 叶酸免疫亲和柱 IAC-SEP

 

IAC-SEP®叶酸免疫亲和柱

                            (产品编号:IAC322)   

使用对象

IAC-SEP®叶酸亲和柱能够特异性的纯化样品中的叶酸它采用了柱状琼脂糖凝胶作为固相载体,琼脂糖凝胶与叶酸抗体偶联形成免疫吸附剂,装柱制成免疫亲和柱。它能够特异性的纯化样品中的叶酸。叶酸亲和柱广泛地应用于饮料、牛奶和谷物等样品的提取,该方法速度快、操作简单、准确性高,对提高食品的质量和安全性起到十分重要的作用。

 

原理

叶酸免疫亲和柱能够特异性的纯化样品中的叶酸将样品与提取液混合、提取、过滤,然后将滤液通过免疫亲和柱。此时,叶酸物质键合在亲和柱中的抗体上。用蒸馏水将免疫亲合柱上的杂质除去。用洗脱液通过分离柱,将叶酸从抗体上分离下来。后,将洗脱液注入HPLC或LC-MS进行测定。

储存条件

该亲和柱保存在2-8 °C条件下,不能冷冻,保质期为18个月。建议在室温(18-30°C)下使用

实验溶液制备

        pH7.4 PBS溶液8.0 克NaCl + 2.90克Na2HPO4 12H2O + 0.24 克 KH2PO4 + 0.2克KCl  加990mL纯水溶解,加纯水至1升。

     10%抗坏血酸钠称取10g L-抗坏血酸钠100mL容量瓶中,加水溶解混匀。

      洗脱液(30%乙腈+0.2%三氟乙酸): 准确量取30mL乙腈加入到100mL容量瓶中,然后再加入0.2mL 三氟乙酸,后用纯水定容至100mL。

 

所需其他试剂:胰酶(sigma P1750)

 

液相色谱条件

色谱柱: Agilent-C18,4.6×150mm(5um)

流动相:0.1%三氟乙酸:乙腈=85:15(v/v)

流速:0.5 mL/min

检测器:紫外检测器,280nm

进样体积:50uL

 

分析步骤

1) 样品提取及稀释

婴儿配方食品、婴儿即食食品、牛奶、奶粉、谷物、能量棒等样品的操作步骤:称取 1-10g样品(根据需要的检测范围确定称量多少),置于250 mL锥形瓶中。将50mL pH7.4 PBS溶液加入到锥形瓶中,混匀。加入4g 胰酶,摇床震荡10分钟。加入6mL 10%抗坏血酸钠,摇床震荡5分钟。将锥形瓶置于37℃的水浴摇床震荡2 h。然后将锥形瓶置于100℃的水浴中静置20min。取出锥形瓶冷却至室温;用pH7.4 PBS溶液定容至100mL,摇匀。将提取液4000 RPM离心10 min。准确移取吸取上层液10 mL,备用

2) 样品的净化

   叶酸免疫亲和柱的柱容量(吸附叶酸)为450ng,当样品中叶酸超过测定范围时,请适当减小上柱体积,使其在检测范围内,计算出准确含量。

食品中folic acid 叶酸免疫亲和柱 IAC-SEP

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