欢迎来到湖南中科弘盛仪器有限公司网站!
产品展示
  首页 >>> 产品展示 >>>  >>> clover试剂盒 >>> (C/N: CE 106)iElisa 磺胺喹噁啉检测试剂盒
产品名称: iElisa 磺胺喹噁啉检测试剂盒
产品时间: 2019-10-23
产品型号: (C/N: CE 106)
产品特点: iElisa 磺胺喹噁啉检测试剂盒

iElisa 磺胺喹噁啉检测试剂盒

iElisa 磺胺喹噁啉检测试剂盒

iElisa 磺胺喹噁啉检测试剂盒 的详细介绍

iElisa 磺胺喹噁啉检测试剂盒

iElisa 磺胺喹噁啉检测试剂盒

1. 概要 磺胺喹嗯啉(sulfaquinoxaline,简称 SQ)在国 内需求量极大的磺胺类高效抗球虫和抗菌药。由于 养殖场在饲养动物过程中向饲料或动物饮用水中 添加,导致其在动物源食品中大量残留。人食用这 些动物源食品后可造成磺胺喹噁啉在人体内富集, 从而使人发生过敏等反应,严重的还会产生致畸、 致癌作用。为此世界各国均制定了相对严格的兽药 残留标准。 2. 原理 测定的基础是抗原-抗体反应。微孔板上包被有 偶联抗原。加入抗体和磺胺喹噁啉标准品或样品, 游离的磺胺喹噁啉与偶联抗原竞争结合抗体,与偶 联抗原结合后的抗体被固定在微孔板上,没有结合 的抗体被洗去,微孔板上的偶联物与经酶标记的二 抗相结合,加入 TMB 底物显蓝色,加入终止液后 颜色由蓝变黄,用酶标仪在 450nm 处检测,吸光值 与样品中磺胺喹噁啉含量成负相关,与标准曲线比 较即可得出磺胺喹噁啉残留物的含量。 3. 试剂盒组成 1) 包被有抗原的96微孔板:1块(96 孔,12 条×8 孔) 2) 磺胺喹噁啉标准品:0 ng/mL、1.0ng/mL、 5.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/m、 l00.0ng/mL、200.0ng/mL 1 瓶 × 1.0mL 3) SQ抗体: 1 瓶 × 10mL 4) 酶标二抗: 1 瓶 × 10mL 5) 10× 浓缩洗涤液: 1 瓶 × 50mL 6) 5×复溶液: 1瓶 × 20mL 7) 稀释缓冲液: 1瓶 × 50mL 8) 显色底物: 1 瓶 × 12mL 9) 终止液: 1 瓶 × 7mL 10) 试剂盒说明书 4. 需要的仪器、试剂 1)仪器 —酶标仪 450nm —微量移液器 20μL~200μL,100μL~1000μL —天平:感量 0.01g —离心机 —振荡器 —氮吹仪 —匀质器 2) 试剂 —乙酸乙酯 —正己烷 —蒸馏水 5. 工作溶液的配制 1) 洗涤液的配制:将浓缩洗涤液用去离子水稀释 10 倍后使用(1 份浓缩洗涤液加 9 份蒸馏水)。 2) 复溶液:用去离子水将 5×浓缩复溶液按 5 倍稀 释(1 份浓缩复溶液加 4 份去离子水) 浓缩复溶 液如有沉淀析出,用 50℃左右水浴温热,沉淀 将消失 6. 样品处理 6.1 肉样 1) 称取 3g 匀质肉样,加入 3mL 水、6mL 乙酸乙 酯,振荡 20min,3000 转离心 10min。 2) 取 4mL 上层乙酸乙酯于另一干净离心管中, 60℃氮气吹干。 3) 分别加入 1mL 正己烷、1mL 复溶液,涡旋 30s, 3000 转离心 10min,取下层用样品稀释液 4 倍 (100μL +300μL)稀释,取 50μL 用于检测 稀释倍数:2 6.2 牛奶 1) 取 2g 新鲜牛奶,加入 6mL 乙酸乙酯,振荡 20min,3000 转离心 10min。 2) 取 1.5mL 上层乙酸乙酯于另一干净离心管中, 60℃氮气吹干。 3) 分别加入 1mL 正己烷、1mL 复溶液,涡旋 30s, 离心 3000g,10min,取下层 50μL 用于检测 稀释倍数:2 6.3 蜂蜜 1) 取2g蜂蜜于离心管中,分别加入4mL水和4mL 乙酸乙酯,振荡 20min,3000 转离心 10min。取 2.5mL 底液于一干净试管中吹干,用 1mL 复溶液复容。 2) 取 1.0mL 上层乙酸乙酯于另一干净离心管中, 60℃氮气吹干。 3) 加入 1mL 样品稀释液复容,取 50μL 用于检测 稀释倍数:2 6.4 鸡蛋 1) 称取 2g 匀质鸡蛋样品,加入 12mL 乙酸乙酯, 振荡 20min,3000 转离心 10min。 2) 取 6mL 上层乙酸乙酯,60℃,氮气吹干。 3) 分别加入 1mL 正己烷、1mL 复溶液,涡旋 30s, 3000 转离心 10min,取下层 50μL 用于检测 稀释倍数:1 7. 酶联免疫分析程序 7.1 测定之前注意事项 1) 使用前将所有试剂平衡至室温(20-25℃)。 2) 使用后迅速将试剂放入 2-8℃冷藏。 3) 在 ELISA 分析中的再现性,很大程度上取决于 洗板的*性,正确的洗板操作是 ELISA 测定 程序中的要点。 4) 所有孵育过程应避免阳光直射,并按要求用盖 板覆盖住酶标板。 7.2 测定程序 1) 将足够标准品和样品所用数量的孔条插入酶 标板架,标准品和样品做两个平行实验,记录 下标准和样品的位置。未使用的酶标板用铝箔 袋封好置 2-8℃冷藏保存。 2) 分别吸取50μL 标准品和样品加至相应的微孔 (双孔)中,然后再各加入50μL 的SQ抗体, 装入袋中密封,室温温育30min。 3) 倒出孔中的液体,每孔加入250μL 稀释好的洗 涤液洗涤,重复操作四次。洗板时每次间隔30s, 洗完后用力在吸水纸上排干。 4) 每孔加入酶标二抗100μL,室温避光温育 20min。 5) 重复步骤3,反复洗涤四次。 6) 每孔加入100μL显色底物,室温避光温育 10min。 7) 每孔加入50μL终止液,混匀。 8) 置于酶标仪中,振荡混匀,在450nm处测定吸 光度值(OD值),参比波长630nm。(iElisa全 自动酶标仪可以直接读出、打印浓度值)。 8. 结果计算 1) 所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值 的平均值(B)除以*个标准(0 标准)的吸 光度值(B0)再乘以 100%,即百分吸光度值。 百分吸光度值(%)= B ×100% B0 以磺胺喹恶啉标准浓度与所获得的各标准点 和样品的平均百分吸光度值值做 log-logit(B/B0 ) 回归。相对应每一个样品的浓度可以从标准曲线上 读出。 2) 样品的实际浓度为读数结果乘以相应稀释倍 数。 3) 如果测定值超出检测范围,样品提取溶液按一 定的比例用稀释后的复溶液进行稀释。 9. 注意事项 1) 室温低于20℃或试剂及标本未回到室温(20- 25℃)会导致数值偏低。 2) 在洗板过程中如果出现板孔干燥过久的情况, 则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现 象。所以洗板排干后应立即进行下一步操作。 3) 标准物质和显色液对光敏感,避免直接暴露在 光线下。 4) 混合要均匀,洗板要彻底(包括加样品和标准 液的时候都必需充分混合均匀)。 5) 反应停止液为强酸性物质,避免接触皮肤。 6) 不要使用过了有效期的试剂盒,也不要稀释或 搀杂使用不同生产厂家的试剂盒这样会引起灵 敏度降低。 7) 试剂盒的储存条件是2-8℃,切勿冷冻。 10. 检测方法灵敏度、准确度、精密度 1) 试剂盒灵敏度: 1.0ppb 2) 试剂盒变异系数:小于 20%。 3) 试剂盒准确度:回收率范围在 70%-120%之 间。

 

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

版权所有 湖南中科弘盛仪器有限公司

管理登陆 站点地图 技术支持:化工仪器网 备案号:
QQ在线客服
电话咨询
  • 17077414028